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提取蛋白的制作方法
点击次数:59 发布时间:2018/1/11

通常提取蛋白质的方法是离心分离,除去血浆,使二价铁血红素酸化,并将其排除。但是这种方法产量很低(100毫升血液仅可提取蛋白质约10)克。

为了提高蛋白质得率,采用新的方法,即用每分钟2 500~3 000转的速度 在15~30分钟内将血液进行离心分离,使醋酸和氯化钠的混合物(比值为2∶1~4∶1)酸化。在温度90~110℃下加热5~15分钟。冷却,再添加乙*。

制作方法:

取经过稳定的血液,作离心分离15~30分钟,每分钟转速为2 500~3 000转。从而取得固形物,去除血浆,用水使固形物沉渣溶解。置血红素于培养基中。为了使培养基酸化而使血红素分子中的二价铁血红素和血球蛋白的结合体分离 预先制备好醋酸和氯化钠的混合物 并将它加热到90~110℃。混合时将固形物的溶血产物缓慢地添加到加热的混合物中。重新把温度逐渐地升高到沸点,煮沸5~15分钟,以便使结合体完全分离,接着将混合物逐步冷却到室温。

为了使二价铁血红素溶解并消除,在混合物中按溶物产物比值2∶1~5∶1添加乙*。这时提取出来的蛋白质呈白棉絮状。将溶液过滤,再用乙*清洗。

100毫升血中提取的蛋白质产品相当于14.4克。应用这种方法,每100毫升的血液可提高蛋白质得率45%。

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